【摘 要】
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旨在确定我国部分养鸡场的鸡出现甩头、精神萎靡和肿头综合征是否由禽偏肺病毒（aMPV）引起，本研究从山东、福建、黑龙江等地的发病蛋鸡和肉鸡场采集鼻甲骨、气管和肺等样品，首先利用aMPV特异性的RT-PCR方法对临床样品进行初步检测，将RT-PCR检测阳性样品接种Vero细胞进行病毒分离，然后利用G/F基因序列分析及间接免疫荧光试验（IFA）等鉴定病毒的亚型，最后将分离株感染SPF鸡进行致病性分析。结
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽免疫抑制病创新团队
【基金项目】
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国家肉鸡产业技术体系（CARS-41-G15）； 黑龙江省自然科学基金（TD2019C003）；
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旨在确定我国部分养鸡场的鸡出现甩头、精神萎靡和肿头综合征是否由禽偏肺病毒（aMPV）引起，本研究从山东、福建、黑龙江等地的发病蛋鸡和肉鸡场采集鼻甲骨、气管和肺等样品，首先利用aMPV特异性的RT-PCR方法对临床样品进行初步检测，将RT-PCR检测阳性样品接种Vero细胞进行病毒分离，然后利用G/F基因序列分析及间接免疫荧光试验（IFA）等鉴定病毒的亚型，最后将分离株感染SPF鸡进行致病性分析。结果显示：在采集的220份样品中，RT-PCR检测结果显示，有3份鼻甲骨样品在228 bp左右出现特异性条带，将阳性病料接种Vero细胞盲传5代后，细胞出现变圆、聚集和融合等aMPV特征性细胞病变（CPE）,表明成功分离到3株aMPV,将其分别命名为SD2001、SD2002和HLJ2101。G和F基因同源性分析显示，来自蛋鸡的SD2001、SD2002和来自肉鸡的HLJ2101分离株的G和F基因与其他B亚型aMPV毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性均较高，核苷酸的相似性分别为93.4%～98.6%和95.6%～100.0%,氨基酸的相似性分别为88.7%～97.8%和97.6%～100.0%;而与A、C和D亚型的G和F基因同源性较低，核苷酸的相似性分别为27.1%～61.8%和66.8%～74.8%,氨基酸的相似性分别为16.1%～36.7%和72.5%～86.5%,这些结果表明，SD2001、SD2002和HLJ2101分离株属于B亚型aMPV。进一步利用B亚型aMPV特异性的阳性血清进行IFA检测，接种SD2001、SD2002和HLJ2101的Vero细胞均可以观察到特异性的绿色荧光信号，进一步证实3个分离株属于B亚型aMPV。选择SD2001感染3周龄SPF鸡进行了致病性研究，结果发现SPF鸡感染后3～6 d出现精神萎靡、甩头和流鼻涕等症状，鼻甲骨、气管和肺也出现病理性损伤，其发病率为90%（18/20）。3株B亚型aMPV的分离不仅有助于明确我国部分养鸡场出现肿头综合征的发病原因，同时也证实B亚型aMPV流行毒株对鸡有明显的致病性，这些结果为我国家禽疫病的诊断和有效防控提供了重要理论依据。
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