【摘 要】
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通过密码子优化、昆虫杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)构建、表达条件筛选及镍柱亲和层析,研究β2肾上腺素受体(β2adrenergicreceptor,β2AR)基因(β2AR)在昆虫细胞Sf9中的高效表达及
【机 构】
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河北北方学院农林科技学院,中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
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通过密码子优化、昆虫杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)构建、表达条件筛选及镍柱亲和层析,研究β2肾上腺素受体(β2adrenergicreceptor,β2AR)基因(β2AR)在昆虫细胞Sf9中的高效表达及纯化策略。方法:人工合成改造后的β2AR基因,将其克隆至转移载体pFastBac1中,构建重组杆状病毒表达质粒pFastBac1-β2AR’,转染昆虫细胞Sf9,优化表达条件,采用镍离子亲和层析法纯化重组蛋白并进行活性鉴定。结果:适宜的表达条件为感染细胞使用的感染复数5、感染后表达时间48h,W
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