【摘 要】
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目的 建立一种能够灵敏、准确地测定人血清中睾酮及雄烯二酮的液相色谱-离子淌度差分质谱(HPLC-DMS-MS/MS)方法.方法 空白血清采用活性炭吸附法处理去除待测物.用叔丁基甲醚
【机 构】
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北京大学第三医院药剂科,北京,100191;北京大学第三医院生殖中心,北京,100191
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目的 建立一种能够灵敏、准确地测定人血清中睾酮及雄烯二酮的液相色谱-离子淌度差分质谱(HPLC-DMS-MS/MS)方法.方法 空白血清采用活性炭吸附法处理去除待测物.用叔丁基甲醚液液萃取处理,进HPLC-DMS-MS/MS分析,色谱柱:Poroshell SB-C18(150×2.1 mm,2.7 μm).流动相为5mM甲酸铵水溶液(含0.1％甲酸)-乙腈(含0.1％甲酸及5％水),梯度洗脱,流速为0.2 mL·min-1,柱温:40℃,进样量:10 μL,电喷雾电离,用多反应检测模式,定量分析离子对分别为m/z 289.2→97.0(睾酮),m/z 287.2→97.1(雄烯二酮),m/z:292.2→97.1(内标睾酮-D3).结果 睾酮的标准曲线方程为y=2.39x +8.34×10-3(r =0.993 3),线性范围为0.05～20 ng· mL-1,雄烯二酮的标准曲线方程为y=1.52x +4.21×10-3(r =0.993 6),线性范围均为0.05～ 20ng·mL-1,睾酮和雄烯二酮的批内、批间精密度均在4.17％ ～ 13.61％,准确度均在93.33％～112.13％,平均提取回收率在64.20％ ～ 80.67％,稳定性好.结论 本方法处理简便、灵敏度高,专属性强,适用于雄激素水平极低患者血清中睾酮及雄烯二酮的浓度检测.
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