探讨尼妥珠单抗对食管癌ECA-109和TE-13细胞放射敏感性的影响及其发生机制。
方法体外培养人食管癌ECA-109和TE-13细胞,分为空白组、照射组、药物组和联合组(照射+药物治疗)。联合组ECA-109、TE-13细胞在照射前24 h给予尼妥珠单抗处理,照射后2 h收集细胞。克隆形成实验检测尼妥珠单抗对人食管癌ECA-109和TE-13细胞的放射增敏作用。流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。Western blot检测表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)、DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)、磷酸化DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(p-DNA-PKcs)和磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的表达。
结果ECA-109细胞联合组的准阈剂量(Dq)、平均致死量(D0)和细胞受到2 Gy照射后的存活分数(SF2)分别为1.11、1.40和0.42,照射组分别为1.72、2.14和0.66,差异均有统计学意义(均P<0.05);TE-13细胞联合组的Dq、D0和细胞受到2 Gy照射后的SF2分别为0.41、0.43和0.40,照射组为0.46、0.65和0.71,差异均有统计学意义(均P<0.05)。尼妥珠单抗对ECA-109细胞和TE-13细胞的放射增敏比为1.35和1.43。流式细胞仪检测结果显示,ECA-109细胞和TE-13细胞联合组的细胞凋亡率均高于照射组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Western blot结果显示,ECA-109细胞和TE-13细胞各组的EGFR和DNA-PKcs的蛋白表达水平均无明显变化(均P>0.05)。ECA-109细胞和TE-13细胞中,照射组p-EGFR和p-DNA-PKcs的表达水平均高于空白组,照射组和药物组γH2AX的表达水平均高于空白组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与照射组和药物组比较,联合组p-EGFR和p-DNA-PKcs蛋白的表达水平均明显降低(均P<0.05),而γH2AX蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。
结论尼妥珠单抗可提高食管癌ECA-109和TE-13细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制EGFR磷酸化及其下调DNA损伤修复蛋白的表达有关。细胞分化程度越低,尼妥珠单抗放射增敏作用越强。