【摘 要】
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葡萄糖醛酸在医药和保健品等领域都有广泛的应用。该研究利用重组大肠杆菌(E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-MIOX)催化肌醇生成葡萄糖醛酸。首先对重组大肠杆菌培养条件进行优化
【基金项目】
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863项目(No.2011AA02A114);教育部博士点基金(No.20100101120030)
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葡萄糖醛酸在医药和保健品等领域都有广泛的应用。该研究利用重组大肠杆菌(E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-MIOX)催化肌醇生成葡萄糖醛酸。首先对重组大肠杆菌培养条件进行优化以达到肌醇氧化酶高效表达的目标,以MBL作为发酵培养基,在对数生长期中期(OD600=5.5)加入0.1 mmol/L IPTG,27℃下诱导6 h,肌醇氧化酶的酶活达到100.5 kU/L。然后利用重组菌菌体作为催化剂转化肌醇生产葡萄糖醛酸,以2 g/L肌醇为底物,30℃下反应2 h,葡萄糖醛酸的产量达到1.7g/L,肌醇的转化率为84%。在此基础上,进一步考察了多次添加新鲜菌体对葡萄糖醛酸合成的影响,当肌醇浓度为50 g/L时,经过3次添加菌体葡萄糖醛酸的最终产量达到15.7 g/L。该研究为生物法生产葡萄糖醛酸打下了坚实的基础。
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