探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β(PI3K/Akt/GSK-3β)信号通路在氢抑制局灶性脑缺血再灌注诱发大鼠神经元凋亡中的作用。

健康成年雄性SD大鼠120只，体重200～220 g，采用随机数字表法分为5组(n＝24)：假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、氢气组(H₂组)、PI3K特异性抑制剂LY294002组(LY组)和LY294002＋氢气组(LY＋H₂组)。采用大脑中动脉阻塞法建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型。H₂组和H₂＋LY组于再灌注即刻吸入67%H₂＋33%O₂混合气体2 h，以后每间隔6 h吸入氢气2 h。LY组和LY＋H₂组于再灌注前10 min侧脑室注射LY294002(10 mmol/L)10 μl。于再灌注24 h时行神经功能缺损评分(NDS评分)，处死大鼠后，取脑组织，TTC染色法确定脑梗死体积，TUNEL法确定皮质神经元凋亡指数(AI)，Western blot法检测缺血侧皮质Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、GSK-3β和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的表达水平，计算p-Akt/Akt比值和p-GSK-3β/GSK3-β比值，免疫组化法确定缺血侧皮质Bcl-2及Bax阳性细胞计数。

与S组比较，I/R组NDS评分、脑梗死体积、AI、p-Akt/Akt比值、p-GSK-3β/GSK-3β比值和Bax阳性细胞计数升高，Bcl-2阳性细胞计数降低(P<0.05)；与I/R组比较，H₂组NDS评分、脑梗死体积、AI和Bax阳性细胞计数降低、p-Akt/Akt比值、p-GSK-3β/GSK-3β比值和Bcl-2阳性细胞计数升高(P<0.05)，LY组和LY＋H₂组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与H₂组比较，LY＋H₂组NDS评分、脑梗死体积、AI和Bax阳性细胞计数升高，p-Akt/Akt比值、p-GSK-3β/GSK-3β比值和Bcl-2阳性细胞计数降低(P<0.05)。

氢抑制脑缺血再灌注诱发大鼠神经元凋亡的机制与激活PI3K/Akt/GSK-3β信号通路有关。