【摘 要】
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目的 探索更高效、稳定的小鼠乳鼠心脏成纤维细胞原代培养的方法.方法 采用Ⅱ型胶原蛋白酶多次消化法,通过控制乳鼠日龄、胶原蛋白酶含量以及消化时间这三个条件,对小鼠乳鼠
【机 构】
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湖北科技学院药学院药理教研室,湖北咸宁437100湖北科技学院医药研究院/糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室,湖北咸宁437100;湖北科技学院医药研究院/糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室,湖北咸宁
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目的 探索更高效、稳定的小鼠乳鼠心脏成纤维细胞原代培养的方法.方法 采用Ⅱ型胶原蛋白酶多次消化法,通过控制乳鼠日龄、胶原蛋白酶含量以及消化时间这三个条件,对小鼠乳鼠心脏成纤维细胞的提取进行优化.使用显微观察心脏成纤维细胞的形态,CCK-8法检测细胞活性,免疫荧光细胞化学染色检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达鉴定细胞纯度.结果 1d日龄、1 g/L胶原蛋白酶、每次消化2min,所得细胞活力最佳,增殖能力最强,且此条件下提取的小鼠乳鼠原代心脏成纤维细胞纯度高于95％.结论 建立了高效、稳定的小鼠乳鼠原代心脏成纤维细胞培养方法.
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