过表达吲哚胺2,3双加氧酶大鼠骨髓间充质干细胞通过外排体抑制免疫排异反应机制的研究

来源 :临床心血管病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lansu_0754
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目的:探讨过表达吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过分泌外排体(exosome)抑制免疫排异反应机制研究。方法:通过慢病毒载体GV308携带IDO转染干细胞构建过表达IDOBMSCs体系并加入基因开启剂强力霉素(DOX)后采用SBI公司的ExoQuick-TC提取分泌的exosome。同时建立大鼠腹腔异位移植心脏模型,经尾静脉给予相应细胞分泌的exosome,利用超声心动图检测经注射过表达IDOBMSCs exosome(过表达IDO-BMSCs exosome组,A组)、空载体-BMSCs exosome(空载体-BMSCs exosome组,B组)、BMSCs exosome(BMSCs exosome组,C组)48h后移植心脏心功能变化,将移植未处理组、给予吗替麦考组作为对照。完成心脏彩超后取A组、B组、C组大鼠注射48h后的脾脏,采用流式细胞技术检测其CD40、CD86、CD80、MHCII、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、Treg细胞的表达情况,将移植未处理组、给予吗替麦考组及正常大鼠(正常组)脾脏细胞作为对照。进一步采用TMT标记定量蛋白质组学分析A组有关调节免疫排异的蛋白。结果:A组的LVEF、FS较其他各组有提高;采用流式细胞技术证实其CD40、CD86、CD80、MHCII、CD45RA、CD45RA+CD45RB表达降低,而CD274、Treg细胞的表达增高。蛋白质谱示:Four and a half LIM domains 1蛋白为调节免疫排异反应的关键蛋白。结论:采用TMT标记过表达IDO-BMSCs分泌exosome内蛋白,Four and a half LIM domains 1蛋白为调节免疫排异反应的关键蛋白。
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