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【摘 要】本实验对注射用头孢噻吩钠含量及有关物质进行测定。方法：采用YMCC18色谱柱（4.6*250*5），0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）为流动相，检测波长为254nm，流速为1.0ml/min。头孢噻吩钠在20～320μg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.99997）。头孢噻吩钠平均回收率分别为99.6%。本法简便、重现性好、回收率高。
【关键词】头孢噻吩钠；含量；测定
头孢噻吩钠为第一代头孢菌素，抗菌谱广，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用，对奈瑟菌属有较好抗菌作用，但流感嗜血杆菌对本品的敏感性较差[1-4]。头孢噻吩钠适用于耐青霉素金葡菌（甲氧西林耐药者除外）和敏感革兰阴性杆菌所致的呼吸道感染、软组织感染、尿路感染、败血症等[5-6]。本实验对注射用头孢噻吩钠含量及有关物质进行测定。
1.仪器与试药
（1）仪器。LC-5500型高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；FE20K 梅特勒FE20K酸度计（北京联合科仪科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；SP-2500型双光束紫外可见分光光度计（苏州市莱顿科学仪器有限公司）；AS-01无油隔膜真空泵（北京优晟联合科技有限公司）；XYF-H 帕恩特超低有机物型超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；SB25-12D超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；AC150-S21恒温水浴锅（赛默飞世尔科技（中国）有现公司）。
（2）色谱柱：YMCC18色谱柱（4.6*250*5）。
（3）对照品：头孢噻吩钠购自中国药品生物制品检定所。
（4）试剂：甲醇（济南新世纪石化有限公司）、醋酸钠（兴源石油化工商贸有限公司）、冰醋酸（济南新世纪石化有限公司）、乙腈（兴源石油化工商贸有限公司）。
（5）试药：头孢噻吩钠。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[7-11]。流动相：0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）为流动相，检测波长：254nm，流速：1.0m·min-1。柱温：室温。理论板数按头孢噻吩钠峰计算应不得低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取干燥后的头孢噻吩钠对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含30μg的溶液，即得。
2.3专属性试验
（1）酸破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，置于0.1mol/L盐酸溶液中，六十度加热半小时，用氢氧化钠溶液调PH为7，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
（2）碱破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，置于0.1mol/L氢氧化钠溶液中，六十度加热半小时，用氢氧化钠溶液调PH为7，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
（3）高温破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，于105"C加热六小时，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
（4）氧化破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，加入1毫升H2O2，放置十分钟，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
实验结果表明上述专属性试验中，头孢噻吩钠主峰与其它杂质峰均分离较好。
2.4精密度试验
精密称取干燥后的头孢噻吩钠对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含40μg的溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。
2.5对照品的线性考察
精密称取适量头孢噻吩钠对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含20、40、80、160、320微克的溶液。按色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，头孢噻吩钠在20～320μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6重现性试验
称取头孢噻吩钠6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.81%，结果表明此方法的重现性良好。
2.7样品稳定性试验
取供试品和对照品置室温下放置10小时，每隔2小时测定一次。实验结果放置0小时，头孢噻吩钠含量为98.96%，杂质峰含量为1.04%；放置2小时，头孢噻吩钠含量为98.82%，杂质峰含量为1.18%；放置4小时，头孢噻吩钠含量为98.38%，杂质峰含量为1.62%；放置6小时，头孢噻吩钠含量为97.83%，杂质峰含量为2.17%；放置8小时，头孢噻吩钠含量为96.39%，杂质峰含量为3.61%；放置10小时，头孢噻吩钠含量为95.13%，杂质峰含量为4.87%。供试品溶液随着放置时间的延长，有关物质的含量增加，故应在配制后立即检测。
2.8准确度试验
分别取已知含量的头孢噻吩钠的9份样品，分别加入一定量的头孢噻吩钠对照品，测定含量，计算回收率，平均回收率为99.6%，RSD=0.86%。结果表明此方法的回收率良好。
2.9樣品含量测定
依照上述含量测定方法测定，结果表明头孢噻吩钠样品的纯度较高。样品中主要杂质峰面积之和均未超过对照品溶液主峰面积的2倍。头孢噻吩钠含量为98.96%，杂质峰含量1.04%。
3.讨论
本实验还分别考察0.25%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇（80：20），乙腈-1%甲酸（20：80），0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-乙腈（80：20），乙晴-水-甲醇（16：80：4，磷酸调节pH值至5.9），0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）不同比例的流动相，结果以0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）为流动相。本实验将供试品溶液室温放置12小时，溶液浓度不变，但杂质量不断增加。本实验采用高效液相法重现性好、回收率高、方法快捷、专属性好，可用于注射用头孢噻吩钠含量及有关物质的测定。
【参考文献】
[1]唐倩，杨元娟，杨宪，曾正渝.高效液相色谱法测定头孢噻吩钠含量和有关物质[J].激光杂志，2010（03）.
[2]许润娟，汤艳群.HPLC法在药品有关物质检查中的应用探讨[J].国际医药卫生导报，2005（07）.
[3]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2000年版.北京：化学工业出版社，2000：196.
[4]梁美凤，李爱香.头孢噻吩钠（弘威雷）的旋光定量法[J].海峡药学，2003（02）.
[5]British Pharmacopoeia Commission.British Pharmacopoeia[M/CD].2000.
[6]唐素芳，吉岡澄江.赋形剂对头孢噻吩钠稳定性影响的研究[J].天津药学，1997（02）.
[7]周淑清，丁志玉.头孢噻吩钠中残留溶媒乙酸乙酯、丙酮的测定[J].黑龙江医药，2007（05）.
[8]樊后民，王刚林.高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中的有关物质[J].中国药房，2005（11）.
[9]李蔚，朱捷，张妍.注射用头孢噻吩钠含量测定及与3种大输液的配伍稳定性分析[J].第三军医大学学报，2011（12）.
[10]钱桂英，柏大为.注射用头孢噻吩钠中高分子聚合物的测定[J].首都医药，2009（12）.
[11]卢彩霞，林力行.制订新药质量标准时有关HPLC法检查有关物质的点滴经验[J].江苏药学与临床研究，2004（03）.
【关键词】头孢噻吩钠；含量；测定
头孢噻吩钠为第一代头孢菌素，抗菌谱广，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用，对奈瑟菌属有较好抗菌作用，但流感嗜血杆菌对本品的敏感性较差[1-4]。头孢噻吩钠适用于耐青霉素金葡菌（甲氧西林耐药者除外）和敏感革兰阴性杆菌所致的呼吸道感染、软组织感染、尿路感染、败血症等[5-6]。本实验对注射用头孢噻吩钠含量及有关物质进行测定。
1.仪器与试药
（1）仪器。LC-5500型高效液相色谱仪（北京东西分析仪器有限公司）；FE20K 梅特勒FE20K酸度计（北京联合科仪科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；SP-2500型双光束紫外可见分光光度计（苏州市莱顿科学仪器有限公司）；AS-01无油隔膜真空泵（北京优晟联合科技有限公司）；XYF-H 帕恩特超低有机物型超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；SB25-12D超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；AC150-S21恒温水浴锅（赛默飞世尔科技（中国）有现公司）。
（2）色谱柱：YMCC18色谱柱（4.6*250*5）。
（3）对照品：头孢噻吩钠购自中国药品生物制品检定所。
（4）试剂：甲醇（济南新世纪石化有限公司）、醋酸钠（兴源石油化工商贸有限公司）、冰醋酸（济南新世纪石化有限公司）、乙腈（兴源石油化工商贸有限公司）。
（5）试药：头孢噻吩钠。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[7-11]。流动相：0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）为流动相，检测波长：254nm，流速：1.0m·min-1。柱温：室温。理论板数按头孢噻吩钠峰计算应不得低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取干燥后的头孢噻吩钠对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含30μg的溶液，即得。
2.3专属性试验
（1）酸破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，置于0.1mol/L盐酸溶液中，六十度加热半小时，用氢氧化钠溶液调PH为7，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
（2）碱破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，置于0.1mol/L氢氧化钠溶液中，六十度加热半小时，用氢氧化钠溶液调PH为7，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
（3）高温破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，于105"C加热六小时，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
（4）氧化破坏试验：取头孢噻吩钠样品约25mg，加入1毫升H2O2，放置十分钟，加流动相制成每1mL含30μg的溶液。按色谱条件测定。
实验结果表明上述专属性试验中，头孢噻吩钠主峰与其它杂质峰均分离较好。
2.4精密度试验
精密称取干燥后的头孢噻吩钠对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含40μg的溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。
2.5对照品的线性考察
精密称取适量头孢噻吩钠对照品，加入流动相溶液使溶解分别配制成每毫升含20、40、80、160、320微克的溶液。按色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。结果表明，头孢噻吩钠在20～320μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.6重现性试验
称取头孢噻吩钠6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.81%，结果表明此方法的重现性良好。
2.7样品稳定性试验
取供试品和对照品置室温下放置10小时，每隔2小时测定一次。实验结果放置0小时，头孢噻吩钠含量为98.96%，杂质峰含量为1.04%；放置2小时，头孢噻吩钠含量为98.82%，杂质峰含量为1.18%；放置4小时，头孢噻吩钠含量为98.38%，杂质峰含量为1.62%；放置6小时，头孢噻吩钠含量为97.83%，杂质峰含量为2.17%；放置8小时，头孢噻吩钠含量为96.39%，杂质峰含量为3.61%；放置10小时，头孢噻吩钠含量为95.13%，杂质峰含量为4.87%。供试品溶液随着放置时间的延长，有关物质的含量增加，故应在配制后立即检测。
2.8准确度试验
分别取已知含量的头孢噻吩钠的9份样品，分别加入一定量的头孢噻吩钠对照品，测定含量，计算回收率，平均回收率为99.6%，RSD=0.86%。结果表明此方法的回收率良好。
2.9樣品含量测定
依照上述含量测定方法测定，结果表明头孢噻吩钠样品的纯度较高。样品中主要杂质峰面积之和均未超过对照品溶液主峰面积的2倍。头孢噻吩钠含量为98.96%，杂质峰含量1.04%。
3.讨论
本实验还分别考察0.25%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇（80：20），乙腈-1%甲酸（20：80），0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-乙腈（80：20），乙晴-水-甲醇（16：80：4，磷酸调节pH值至5.9），0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）不同比例的流动相，结果以0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.5%醋酸钠溶液（冰醋酸调节pH值至5.9）-甲醇一乙腈（80：5：15）为流动相。本实验将供试品溶液室温放置12小时，溶液浓度不变，但杂质量不断增加。本实验采用高效液相法重现性好、回收率高、方法快捷、专属性好，可用于注射用头孢噻吩钠含量及有关物质的测定。
【参考文献】
[1]唐倩，杨元娟，杨宪，曾正渝.高效液相色谱法测定头孢噻吩钠含量和有关物质[J].激光杂志，2010（03）.
[2]许润娟，汤艳群.HPLC法在药品有关物质检查中的应用探讨[J].国际医药卫生导报，2005（07）.
[3]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2000年版.北京：化学工业出版社，2000：196.
[4]梁美凤，李爱香.头孢噻吩钠（弘威雷）的旋光定量法[J].海峡药学，2003（02）.
[5]British Pharmacopoeia Commission.British Pharmacopoeia[M/CD].2000.
[6]唐素芳，吉岡澄江.赋形剂对头孢噻吩钠稳定性影响的研究[J].天津药学，1997（02）.
[7]周淑清，丁志玉.头孢噻吩钠中残留溶媒乙酸乙酯、丙酮的测定[J].黑龙江医药，2007（05）.
[8]樊后民，王刚林.高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中的有关物质[J].中国药房，2005（11）.
[9]李蔚，朱捷，张妍.注射用头孢噻吩钠含量测定及与3种大输液的配伍稳定性分析[J].第三军医大学学报，2011（12）.
[10]钱桂英，柏大为.注射用头孢噻吩钠中高分子聚合物的测定[J].首都医药，2009（12）.
[11]卢彩霞，林力行.制订新药质量标准时有关HPLC法检查有关物质的点滴经验[J].江苏药学与临床研究，2004（03）.