【摘 要】
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目的:探索孕早期增塑剂邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）暴露对小鼠子宫内膜蜕膜化的影响及长链非编码RNA RP24-315D19.10的作用。方法:构建DEHP(1000 mg·kg-1·d-1)暴露的早孕小鼠模型,取妊娠第6天子宫,通过HE染色和免疫荧光检测其对小鼠子宫内膜蜕膜区病理变化及相关分子表达。构建DEHP暴露（0.1、0.5、2.5、12.5、62.5μmol/L）的原代小鼠子宫
【机 构】
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重庆医科大学公共卫生学院生殖生物学研究室教育部生殖与发育国际合作联合实验室
【基金项目】
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重庆市自然科学基金（cstc2020jcyj-msxmX0041）；
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目的:探索孕早期增塑剂邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）暴露对小鼠子宫内膜蜕膜化的影响及长链非编码RNA RP24-315D19.10的作用。方法:构建DEHP(1000 mg·kg-1·d-1)暴露的早孕小鼠模型,取妊娠第6天子宫,通过HE染色和免疫荧光检测其对小鼠子宫内膜蜕膜区病理变化及相关分子表达。构建DEHP暴露（0.1、0.5、2.5、12.5、62.5μmol/L）的原代小鼠子宫内膜基质细胞体外蜕膜化诱导模型,通过光学显微镜和鬼笔环肽染色观察细胞形态变化,免疫荧光、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测蜕膜化标志分子的表达情况。实时荧光定量PCR分别检测RP24-315D19.10在蜕膜组织和蜕膜细胞中的表达。利用在线工具lncLocator和RNA荧光原位杂交检测RP24-315D19.10的细胞定位,并运用在线工具AnnoLnc2预测与RP24-315D19.10相结合的微RNA（miRNA）。结果:DEHP暴露组的胚胎着床点数、子宫湿重、子宫面积显著低于空白对照组,蜕膜化标志分子基质金属蛋白酶、同源异型框A10的表达也明显少于空白对照组（均P＜0.05）。随着DEHP浓度增加,蜕膜细胞中dtprp的表达逐渐降低。2.5μmol/L DEHP暴露组中基质细胞向蜕膜细胞的形态转化受到明显抑制,蜕膜化标志分子同源异型框A10、骨形成蛋白2及增殖细胞核抗原表达水平显著低于空白对照组（均P＜0.05）。DEHP暴露的蜕膜组织和蜕膜细胞中RP24-315D19.10的表达显著减少（均P＜0.05）。RP24-315D19.10主要定位于细胞质,与45个miRNA有潜在结合位点,其中miR-138-5p、miR-155-5p、miR-183-5p及miR-223-3p与子宫内膜蜕膜化有关。结论:孕早期DEHP暴露导致小鼠蜕膜化损伤可能与RP24-315D19.10表达下调有关。
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