【摘 要】
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目的建立末梢全血干血点中25-羟基维生素D3(25-OH-Vit D3)与25-羟基维生素D2(25-OH-Vit D2)的高效液相色谱-串联质谱定量检测方法,并分析北京与西宁地区7岁以下儿童维生素D营
【机 构】
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儿童发育营养组学北京市重点实验室首都儿科研究所; 实验中心首都儿科研究所; 北京汇智泰康医药技术有限公司;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年项目(81400848);国家自然科学基金青年项目(81500079)
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目的建立末梢全血干血点中25-羟基维生素D3(25-OH-Vit D3)与25-羟基维生素D2(25-OH-Vit D2)的高效液相色谱-串联质谱定量检测方法,并分析北京与西宁地区7岁以下儿童维生素D营养状况,为两地佝偻病防治提供依据。方法末梢全血干血片样本经甲醇超声沉淀蛋白,乙酸乙酯萃取,和PTAD衍生,衍生产物用ZORBAX SB-Phenyl色谱柱分离,质谱多重反应监测(MRM)模式检测,同位素内标法定量。结果 25-OH-Vit D3与25-OH-Vit D2在0. 50-100 ng/ml与0. 50-50 ng/ml线性范围内线性良好(R2> 0. 99),最低定量限(LLOQ)均为0. 5 ng/ml。高、中、低3个浓度水平的批内相对标准偏差(RSD%)小于9%,批间RSD%小于11%,回收率范围为87. 36%～113. 58%。北京与西宁两地25-OH-Vit D含量水平及维生素D营养状况与既往研究一致。结论本方法快速、准确、样品需求量小,全血干血点25-OH-Vit D经红细胞比容校正后可有效评估维生素D营养状况,适用于有限采血条件下人群维生素D营养状况评估。
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