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为建立一种快速高通量的荷斯坦奶牛脊柱畸形综合征（complex vertebral malformation，CVM）的分子检测方法，根据CVM是由于SLC35A3基因第4外显子559位处发生G→T突变的遗传学基础，利用Assay Design SW软件设计了1对PCR引物和1条测序引物对三种不同基因型的基因材料进行测序分析，建立焦磷酸测序检测方法。对55份进境荷斯坦奶牛血样进行检测，发现有1例为隐性基因携带者，将PCR产物进行测序，其DNA序列与焦磷酸测序检测结果一致。研究表明该方法是一种有效的新方法，