【摘 要】
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目的 分析前列腺上皮细胞的膜蛋白质构成.方法 将无前列腺病史的尸检前列腺标本常规制备冰冻组织切片,通过激光捕获显微切割(LCM)从组织冰冻切片中切取前列腺上皮细胞,Shotgu
【机 构】
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吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室,吉林大学第二临床医院普通外科
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目的 分析前列腺上皮细胞的膜蛋白质构成.方法 将无前列腺病史的尸检前列腺标本常规制备冰冻组织切片,通过激光捕获显微切割(LCM)从组织冰冻切片中切取前列腺上皮细胞,Shotgun-MS技术分析膜蛋白质组学构成.结果 激光捕获显微切割可正确有效地分离前列腺上皮细胞,其同质性＞95%;在严格的过滤参数条件下(当Charge+1,Xcorr≥1.9;当Charge+2,Xcorr≥2.2;当Charge+3,Xcorr≥3.75;其中DelCN≥0.1),正常前列腺上皮细胞中鉴定出1164个蛋白,其中799个蛋白经过基因本体评注(GOA)显示为已知细胞组分,其余为未知细胞组分.在已知细胞组分中377(49.15%)个蛋白为膜蛋白或者膜相关蛋白.除了已知的与膜相关的蛋白,很多新的蛋白也被鉴定,其中包括假设蛋白和一些cDNA序列.结论 Shotgun-MS结合LCM技术可以有效分析前列腺的膜蛋白质构成;有助于正常前列腺细胞膜蛋白质表达库的完善.
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