【摘 要】
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目的:通过参元丹胶囊含药血清对心肌细胞活性、培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)活性、LC3微管相关蛋白LC3及自噬相关基因Beclin1-mRNA表达影响的研究,探讨参元丹胶囊对心肌缺血保
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目的:通过参元丹胶囊含药血清对心肌细胞活性、培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)活性、LC3微管相关蛋白LC3及自噬相关基因Beclin1-mRNA表达影响的研究,探讨参元丹胶囊对心肌缺血保护作用及作用机制。方法:分离1~3天龄Wistar大鼠心肌细胞进行细胞培养,采用无血清无糖培养建立心肌缺血细胞模型,于不同时间点加入参元丹胶囊含药血清,采用MTT法、比色法、蛋白免疫印迹技术(Western Blot)及逆转录PCR(RT-PCR)测定细胞活性、上清培养LDH含量、微管相关蛋白LC3蛋白(LC3I及LC3II)表达及哺乳动物自噬相关基因Beclin1-mRNA表达。结果:10%参元丹含药血清与相应时间点10%空白血清比较,能明显增加心肌缺血模型中3、6、18及24h心肌细胞活性(P<0.01)、降低培养液上清LDH活性(P<0.05);通过计算LC3II/LC3I比值发现参元丹含药血清能明显抑制缺血诱导24h的细胞自噬活性(P<0.05),而对心肌缺血模型各个时间点Beclin1-mRNA的表达没有影响。结论:参元丹含药血清对心肌细胞缺血损伤有保护作用,并可以在心肌细胞缺血较长时间后抑制自噬的活性,但其对自噬活性的影响可能与Beclin1表达无关。
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