【摘 要】
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本实验仿照高温致畸动物模型的制作程序处理原代培养的神经细胞,取受精后10 d金黄地鼠胚胎神经管制成细胞悬液,进行原代培养.随机分为对照组和高温组,高温组于接种后24 h置42
【机 构】
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潍坊医学院,组织学与胚胎学教研室,潍坊,261042山东医科大学,组织学与胚胎学教研室,济南,250012;
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本实验仿照高温致畸动物模型的制作程序处理原代培养的神经细胞,取受精后10 d金黄地鼠胚胎神经管制成细胞悬液,进行原代培养.随机分为对照组和高温组,高温组于接种后24 h置42 C水浴中持续20 min;对照组置37 C水浴中持续20min,于37C、5%CO2孵箱中继续培养.应用倒置相差显微镜、扫描电镜、透射电镜、MTT测定、凝胶电泳、原位末端标记(TUNEL)、免疫细胞化学反应以及图像分析等技术,观察了高温对原代培养神经细胞的影响.结果显示:高温可使神经细胞的凋亡数增多、存活数减少、神经网络稀疏.高温后细胞内超微结构也发生明显变化,表现为核形态不规则,染色质浓缩、边聚,粗面内质网、高尔基复合体膨大,线粒体结构基本正常.MTT测定示细胞内线粒体酶的活性降低,DNA电泳可见梯状带纹,TUNEL较DNA电泳更敏感,且可在原位显示单个凋亡细胞.高温可诱导bcl-2和bax蛋白产物表达出现异常变化.上述结果表明,高温可诱导原代培养神经细胞凋亡,bcl-2和bax在高温诱导凋亡过程中发挥重要调节作用.
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