二重荧光定量RT-PCR检测胰腺癌患者CD44v6基因的表达

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目的建立一种敏感、特异的二重TaqMan实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法,定量检测CD44v6基因在胰腺癌患者中的mRNA表达水平。方法设计目的基因CD44v6和内参基因β-actin的引物与探针并构建两者的重组质粒,通过优化反应条件,建立二重qRT-PCR方法的标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估。应用该方法定量检测18例胰腺癌患者外周血单核细胞(PBMC)中CD44v6mRNA的表达水平。结果成功了构建该方法的标准曲线,其特异性较高,重复性良好,CD44v6和β-acti
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