酿酒酵母蔗糖酶基因的克隆、异源表达及重组酶学性质研究

来源 :广西科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jiexp

【摘要】

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以酿酒酵母（Saccharom yces cerevisiae）基因组DNA为模板，通过PCR扩增得到蔗糖酶基因（suc 2），并将其克隆到表达载体pSE380中，将得到的重组质粒pSE-suc2转化进E．coli BL21中，利用镍金属

【作者】

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杜丽琴杨键朱绮霞杨登峰韦宇拓黄日波

【机构】

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广西大学生命科学与技术学院,广西科学院

【出处】

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广西科学

【发表日期】

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2008年2期

【关键词】

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蔗糖酶克隆表达酶学性质 invertase cloning expression characterization

【基金项目】

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广西科技攻关项目（桂科攻0630003A2）,广西科学基金项目（桂科青0640006）,广西大学科研基金项目（X061060）资助.

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以酿酒酵母（Saccharom yces cerevisiae）基因组DNA为模板，通过PCR扩增得到蔗糖酶基因（suc 2），并将其克隆到表达载体pSE380中，将得到的重组质粒pSE-suc2转化进E．coli BL21中，利用镍金属螯合层析方法分析测定其酶学性质。重组菌株的SDS-PAGE结果显示重组蔗糖酶基因（suc 2）有60kD。目的蛋白出现，纯化的SDS-PAGE分析得到均一的蛋白条带；重组蔗糖酶的Km值为47．73mmol／L，最大反应速率为79．59mg还原糖mg^-1蛋白min^-1，

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