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目的
探讨神经肽Y(NPY)对小鼠成骨细胞系细胞（MC3T3-E1细胞）成骨分化的生物学效应，并从Wnt信号通路角度探讨其可能的机制。
方法体外培养MC3T3-E1细胞，将不同浓度的NPY（10-8 mol/L、10-10 mol/L、10-12 mol/L）作用于细胞，在培养的不同时期（1、3、5、7、9 d）使用噻唑蓝法检测细胞增殖情况。成骨诱导条件下将不同浓度的NPY作用于MC3T3-E1细胞，在传代培养的不同时期（4、7、14 d）采用免疫细胞化学、Western blot对MC3T3-T1细胞诱导进行鉴定并确定促成骨效应最适的浓度；成骨诱导4 d时将最适浓度NPY、NPY加经典Wnt通路抑制因子(DKK1)、NPY加Y1受体拮抗剂分别作用于细胞，采用Western blot法检测经典Wnt通路相关蛋白（β-catenin和p-GSK-3β）的表达，免疫荧光检测各组β-catenin蛋白核内转移的情况。
结果与对照组相比，不同浓度的NPY在7、9 d时均显著促进MC3T3-E1细胞增殖。成骨诱导条件下，NPY（10-8 mol/L）和NPY（10-10 mol/L）浓度组、NPY（10-10 mol/L）和NPY（10-12 mol/L）浓度组分别在4 d、14 d时显著促进碱性磷酸酶(ALP)蛋白表达。NPY促成骨效应的最适浓度为10-10 mol/L。在成骨诱导4 d时，使用DKK1或Y1受体拮抗剂可以显著抑制NPY（10-10 mol/L）组对ALP蛋白表达的促进作用，虽然β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达未受影响，但是NPY可明显激活β-catenin的核内转移。
结论NPY促进MC3T3-E1细胞成骨分化过程中ALP的蛋白表达，该效应可能是通过经典Wnt信号通路介导。