【摘 要】
：
本研究旨在克隆奶牛脑肌类芳香烃受体核转位蛋白1基因（Brain and Muscle Arnt-Like Protein 1，BMAL1）的蛋白编码序列（Coding Sequence，CDS）并构建其真核表达载体，运用生物信息学方法解析其CDS序列和编码蛋白特性。以牛肝脏组织为材料，利用PCR技术扩增奶牛BMAL1基因中带有同源臂的CDS片段。采用同源重组法，将目的片段连接至酶切线性化的pcDN
【基金项目】
：
国家自然科学基金面上项目（31771301）； 中国博士后科学基金第11批特别资助（2018T111112）； 西北农林科技大学大学生创新创业训练计划校重点项目（X202210712221）； 国家卫生健康委员会时间生物学重点实验室（四川大学）开放基金项目（NHCC-2022-01）；
论文部分内容阅读
本研究旨在克隆奶牛脑肌类芳香烃受体核转位蛋白1基因（Brain and Muscle Arnt-Like Protein 1，BMAL1）的蛋白编码序列（Coding Sequence，CDS）并构建其真核表达载体，运用生物信息学方法解析其CDS序列和编码蛋白特性。以牛肝脏组织为材料，利用PCR技术扩增奶牛BMAL1基因中带有同源臂的CDS片段。采用同源重组法，将目的片段连接至酶切线性化的pcDNA3.1-Puro-N-3HA真核表达载体上，酶切及测序结果均符合预期的质粒命名为pcDNA3.1-3HA-cBMAL1。将空载与重组质粒分别转染至HEK293T细胞，通过实时荧光定量PCR技术（qPCR）和Western Blotting技术检验奶牛BMAL1基因的过表达效果，并利用生物信息学软件分析BMAL1基因CDS区及其编码蛋白的特性和功能。结果显示，pcDNA3.1-3HA-cBMAL1真核表达载体构建成功，将该质粒转染至HEK293T细胞后，成功实现了BMAL1在mRNA和蛋白水平的过表达；牛BAML1基因与绵羊、山羊同源性最高，BMAL1蛋白为不稳定蛋白，其上不存在信号肽以及跨膜结构，共包含72个磷酸化位点，其二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主，参与生物钟基因节律性表达调控等过程。本研究构建了奶牛BMAL1基因的真核表达载体，在HEK293T细胞中成功过表达，并进行了系统的生物信息学分析，为进一步探究奶牛BMAL1基因的功能和奶牛生物钟系统的分子调控机制奠定基础。
其他文献
企业现代化发展过程中，财务管理占据至关重要的地位，高效的财务管理工作不仅能够协调企业财务与业务之间的关系，还能一定程度上降低企业经营成本，使得企业经营效益得到大幅度提升。在财务管理过程中，会计分为财务会计和管理会计两种理念的管理类型，其中，财务会计的工作重点侧重与企业诸多经济事项上，而管理会计的工作重点集中在企业的发展战略规划。本文首先介绍了管理会计与财务会计的含义以及差异与关联性，然后分析了企业
神经认知注意功能涉及多个脑区的协作,协作中的缺陷会导致注意缺陷多动障碍（Attention-deficit/hyperactivity disorder,ADHD）,这是儿童最常见的神经精神疾病之一。目前ADHD的诊断主要基于主观评价,容易受临床医生经验的影响,缺乏客观指标的支持。由于注意功能与其他认知功能之间具有复杂的联系,本研究使用脑电图技术,设计注意网络测试实验,采集大量事件相关电位数据,提
客户对电力能源商品及附加服务的期望普遍提升,不同地域、不用类型的客户群体服务需求更加多元,现代服务体系建设和客户投诉管控工作面临新挑战。国网重庆市电力公司市北供电分公司坚持数据驱动,深挖诉求价值,积极探索与实践诉前排查治理、诉中快速处理、诉后持续改善的客户投诉全周期处置管理,促进服务能力更强更好。
随着科技与经济的不断发展,越来越多的人们开始对出行方式、通勤时间有了更高的要求。网约车模式的出现丰富了人们的出行方式,在为人们提供便利的同时,也为城市交通拥堵带来了负面的影响。一方面是城市人口数量的不断增多,给城市现有交通基础设施不断施加压力,另一方面是乘用车的保有量越来越高,网约车模式使得一部分人群灵活就业做专车司机,使得交通道路上的乘用车也越来越多。因此如何精准的预测道路的拥堵情况,为司机和人
详细论述了当前甲醇制烯烃技术发展概况，提出了未来甲醇制烯烃技术发展趋势，并针对实际情况对我国发展甲醇制烯烃提出一些建议。
近年来,随着生活水平的不断提高,饮食模式也多种多样,其中高脂高果糖饮食（High-fat high-fructose diet,HFFD）已成为当今世界最普遍的饮食模式,导致多种代谢性疾病的增加,如肥胖、Ⅱ型糖尿病、心血管疾病等。沙棘（Hippophae rhamnoides Linn）是一种“药食同源”的浆果类植物,富含丰富的维生素和黄酮类化合物等对人体健康有益的活性物质。沙棘黄酮是沙棘中主要组
目的 探讨冠状动脉小血管置入生物可降解涂层药物洗脱支架（BP-DES）术后不同双联抗血小板治疗（DAPT）时长对患者长期临床预后的影响。方法 选取I-LOVE-IT 2研究中置入BP-DES且参考血管直径＜2.75 mm的1 064例患者为研究对象。根据DAPT时长将患者分为6个月双抗组（n=549）与12个月双抗组（n=515）。本研究的主要终点为48个月的靶病变失败（TLF）,包括心源性死亡、
【目的/意义】当前，产学研合作知识转移已经引起业界的广泛关注，其中信任在知识转移过程中也发挥着关键的推动作用，然而当前鲜有研究重视信任的动态演化规律。【设计/方法】根据信任视角，在将信任划分为计算型信任、关系质量型信任以及制度型信任的基础上，构建了信任影响产学研合作知识转移的因果关系模型和系统流图。进一步地，采用Vensim PLE软件对所构建的系统动力学模型进行了模型检验与灵敏度分析。【结论/发
＜正＞烟台是一座因港而兴的城市，烟台港的形成经历了一个漫长的历史过程。在参考烟台地区考古材料及历史文献的基础上，着重讲述了芝罘湾与烟台港的逻辑关系、烟台港与明代烟台城市兴起的逻辑关系、天然港口向人工港的转变，尤其是在烟台开埠后，新成立的东海关对于港口的管理和建设，并引导烟台港走向近代港口行列的过程。