【摘 要】
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以小鼠胚胎干细胞(ES-D3)为模型,应用新型细胞培养系统——STLV型旋转生物反应器(rotarycellculturesystem,RCCS)建立一种批量制备拟胚体(embryoidbodies,EBs)的新方法,研究
【机 构】
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中国科学院大连化学物理研究所1802组; 军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心; 北京100850; 军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心 大连11602
【基金项目】
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Thisworkwassupportedby863ProgramofChinainTissueEngineering(No.2003AA205040),863ProgramofChinainSpaceTechnology(No.2004AA744052)andKeyProjectofBeijinginTissueEngineering(No.H020920050031).
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以小鼠胚胎干细胞(ES-D3)为模型,应用新型细胞培养系统——STLV型旋转生物反应器(rotarycellculturesystem,RCCS)建立一种批量制备拟胚体(embryoidbodies,EBs)的新方法,研究不同细胞接种密度及培养时间对RCCS内EBs产生效率的影响。为了进一步研究该制备方法是否对EBs的分化潜能产生影响,对照传统方法制备的EBs,利用形态学及RT-PCR方法测定经旋转生物反应器制备的EBs在自发性或诱导条件下(1%DMSO)向心肌细胞的分化能力。结果表明:ES-D3在RCCS内能够高效形成EBs,与传统的直接悬浮法比较,其EBs的形成效率可达到后者的2倍。1×104个/ml为最佳细胞接种密度,培养时间也是在RCCS制备EBs过程中的重要因素之一,培养第4~5天为最佳收获EBs的时间。与悬滴法制备的EBs比较,该方法制备的EBs分化为心肌细胞的潜能未改变。由此,应用旋转生物反应器可以高效制备EBs,该方法制备的EBs可以用于发育生物学等基础及应用领域的相关研究。
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