【摘 要】
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目的评估心肌点注射法慢病毒(lentivirus, Lv)介导降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)基因转导糖尿病大鼠的可行性及此法对糖尿病心肌在遭受缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤时是否具有保护作用。方法将60只200~220 g健康雄性SD大鼠采用随机数字表法分为5组(每组12只):对照组(C组)、糖
【机 构】
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030001 太原,山西医科大学麻醉系,030001 太原,山西医科大学第二医院麻醉科,030001 太原,山西医科大学麻醉系,030001 太原,山西医科大学麻醉系,030001 太原,山西医科大学
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目的评估心肌点注射法慢病毒(lentivirus, Lv)介导降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)基因转导糖尿病大鼠的可行性及此法对糖尿病心肌在遭受缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤时是否具有保护作用。
方法将60只200~220 g健康雄性SD大鼠采用随机数字表法分为5组(每组12只):对照组(C组)、糖尿病组(DM组)、心肌注射手术组(Sham组)、心肌注射对照组(MC组)、心脏转导组(ME组)。采用心肌点注射法将Sham组、MC组、ME组大鼠在体分别注射生理盐水、滴度2×107病毒基因组(virus genomes, vg)/ml的携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, eGFP)基因的慢病毒(Lv-eGFP)及携带CGRP基因的Lv-eGFP(Lv-CGRP-eGFP)各50 μl。转染1周后DM组、Sham组、MC组、ME组行链脲佐菌素(streptozocin, STZ)50 mg/kg腹腔注射,建立糖尿病模型。注射STZ 8周后采用冠状动脉左前降支结扎法制备心脏I/R模型。比较各组大鼠甩尾反射潜伏期,心肌、脊髓、背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)组织中eGFP表达情况、CGRP基因转录水平、CGRP蛋白表达含量,心肌缺血危险区面积(area at risk, AAR)及梗死区面积(infarct size, IS)。
结果与C组比较,DM组、Sham组、MC组、ME组大鼠自糖尿病造模成功4周末开始甩尾反射潜伏期明显延长(P<0.05)。DM组、Sham组、MC组缺血区心肌、T1~T5脊髓、T1~T5 DRG CGRP转录水平低于C组、ME组(P<0.05),ME组缺血区心肌、T1~T5 DRG CGRP转录水平高于C组(P<0.05)。C组、ME组T1~T5脊髓、T1~T5 DRG、缺血区心肌及血清CGRP含量高于DM组、Sham组、MC组(P<0.05),ME组T1~T5脊髓、缺血区心肌CGRP含量高于C组(P<0.05)。DM组、Sham组、MC组IS/AAR高于C组、ME组(P<0.05),ME组IS/AAR高于C组(P<0.05)。
结论心肌点注射转导CGRP基因可有效提高糖尿病大鼠心脏I/R时CGRP表达,CGRP增多可减轻糖尿病大鼠心脏I/R损伤。
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