【摘 要】
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通过生物工程获得人重组细胞周期蛋白(cyclin D1)及细胞周期蛋白激酶CDK4蛋白,作为抗癌药物筛选的分子靶点.从人HL-60细胞中获得细胞周期蛋白D1/CDK4基因的cDNA,先克隆至pGEM
【机 构】
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中山大学肿瘤防治中心,中国科学院上海药物研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金 (No:3 0 10 0 2 2 7);国家 863课题 (No :2 0 0 1AA2 3 40 11);中山医科大学“2 11工程”肿瘤学重点学科基金 (No :980 69)联合资助~~
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通过生物工程获得人重组细胞周期蛋白(cyclin D1)及细胞周期蛋白激酶CDK4蛋白,作为抗癌药物筛选的分子靶点.从人HL-60细胞中获得细胞周期蛋白D1/CDK4基因的cDNA,先克隆至pGEM T-Easy载体上,再经重组构建供体质粒pFastBac-D1和pFastBac-CDK4.重组供体质粒转化感受态DH10Bac细胞,挑取确证为白色克隆的菌落振荡培养,分离制备高纯度杆粒DNA.以重组病毒适量感染昆虫细胞Tn-5B1-4,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞Tn-5B1-4(Hi
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