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目的建立定量检测新生儿滤纸干血斑中促甲状腺素(TSH)的一步化学发光免疫分析方法。方法应用含有表面活性剂NP40s的滤纸干血斑高效蛋白洗脱液作为TSH洗脱液,抗人h-TSH单克隆抗体(mAb)作为辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体,抗人α-TSH的mAb作为固相包被抗体,鲁米诺作为发光底物,建立一步新生儿滤纸干血中TSH双抗体夹心化学发光免疫定量检测方法。结果所用高效蛋白洗脱液NP40s最佳工作浓度为55‰,最佳洗脱反应时间为3 h,该方法检测灵敏度为1.02 mIU/L,线性范围为1.6~160 mIU/L,批内变异系数为3.18%~8.95%,批间变异系数为5.43%~9.26%,添加回收率在87.23%~114.36%之间,稀释回收率在96.80%~111.00%之间,与TSH类似物黄体生成素h链(hLH)、促卵泡激素h链(hFSH)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)均无明显交叉反应,与现有新生儿滤纸干血TSH检测试剂盒相关性良好,相关系数为0.969 90。结论该方法 TSH洗脱和与抗体结合反应只需一步就能实现,整个检测过程在室温下就可完成,并且具有较高的灵敏度、重复性和准确性,完全可用于新生儿滤纸干血中TSH的定量检测。