【摘 要】
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目的 探讨血红素加氧酶1(HO-1)对白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响及其可能机制.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)为正常对照.白蛋白对照组加去脂的小牛血清白蛋白(BSA)30 g/L共同培养.干预组先加钴卟啉(Cobalt protoporphyrinIX,CoPP,血红素加氧酶1诱导剂)5 μmol/L,0.5 h后再加入BSA 30 g/L,作用24 h.四甲基偶氮唑盐(
【机 构】
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目的 探讨血红素加氧酶1(HO-1)对白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响及其可能机制.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)为正常对照.白蛋白对照组加去脂的小牛血清白蛋白(BSA)30 g/L共同培养.干预组先加钴卟啉(Cobalt protoporphyrinIX,CoPP,血红素加氧酶1诱导剂)5 μmol/L,0.5 h后再加入BSA 30 g/L,作用24 h.四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测CoPP对BSA抑制NRK-52E细胞增殖的影响.细胞免疫荧光染色检测细胞凋亡率.RT-PCR法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax mRNA表达情况.结果 与正常对照组比较,BSA对细胞增殖具有抑制作用并诱导细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.05),而CoPP对BSA引起的细胞毒性作用具有保护作用(P<0.05);BSA对照组HO-1 mRNA表达增加(0.44±0.06比0.39±0.05,P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05).CoPP预处理后,HO-1mRNA表达(0.50±0.06)较BSA对照组增加(P<0.05).BSA可上调Bax mRNA表达(0.87±0.04比0.67±0.03,P<0.05)及下调Bcl-2 mRNA的表达(0.25±0.04比0.42±0.02,P<0.05),当加入CoPP预处理后可抑制上述改变(Bax mRNA:0.75±0.07,Bcl-2 mRNA:0.36±0.03,均P<0.05).结论 BSA可显著增加细胞的凋亡率并直接调控凋亡相关蛋白mRNA的表达,CoPP可抑制上述BSA的作用.HO-1对BSA所致肾小管上皮细胞凋亡具有保护作用,可以抑制细胞凋亡。
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