目的探讨CH03对MCAO模型大鼠BBB的保护作用及其机制,以期寻找有效的治疗中风的药物及相关靶点。方法采用大脑中动脉内线栓法建立MCAO脑缺血模型,通过伊文氏蓝渗漏法观察BBB通透性、利用电镜观察神经血管单元的超微结构,从形态学和结构上考察了CH03对缺血后BBB损伤的保护作用;采用WB,RT-PCR和免疫组化对BBB组成中内皮细胞间的紧密连接、星形胶质细胞和基膜进行检测;并采用ELISA试剂盒对脑缺血后炎症级联反应及继发的自由基进行检测。结果 EB渗漏实验结果表明,模型组BBB通透性显著增加,CH03各剂量组明显逆转这一作用(P<0.01);电镜观察皮层神经血管单元的超微结构表明,CH03中、高剂量组能够显著减轻神经元固缩,胞质、胞核电子密度显著降低,星形胶质细胞足突的肿胀、内皮细胞的反应性增大及毛细血管变形减轻;染色结果显示,CH03中、高剂量组显著降低水通道蛋白-4(AQP4)、增加闭锁小带蛋白(ZO-1)和咬合蛋白的表达(P<0.01);RT-PCR和免疫荧光技术观察到CH03各剂量组均可逆转脑缺血再灌引起的基质金属蛋白酶-9(MMP9)的表达增加,并且MMP9与神经元特异性核蛋白(NeuN)共定位。ELISA检测炎性因子结果表明,CH03各剂量组可明显降低TNF-α、增加IL-10的表达;增加组织总谷胱甘肽过氧化物酶、总超氧化物歧化酶和总过氧化物酶活性,降低丙二醛(MDA)的含量。提示CH03对BBB结构具有保护作用。讨论 CH03显著改善MCAO模型大鼠BBB的通透性并可以改善细胞毒性脑水肿;保护BBB与增加紧密连接相关蛋白的表达、降低AQP4表达而减轻脑水肿、降低MMP9的表达而减小对细胞外基底膜的降解作用等有关;CH03也可通过增加抗氧化酶活性、减少神经炎症损伤而保护BBB完整性。