【摘 要】
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目的 探讨TROP-2基因小干扰RNA( siRNA)对乳腺癌细胞黏附和侵袭力的影响。方法 培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468及ZR75-1细胞株,以荧
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目的 探讨TROP-2基因小干扰RNA( siRNA)对乳腺癌细胞黏附和侵袭力的影响。方法 培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468及ZR75-1细胞株,以荧光实时定量PCR方法检测TROP-2基因mRNA表达;筛选出TROP-2表达最高者。采用TROP-2基因小干扰RNA转染乳腺癌细胞,分别以荧光实时定量RT-PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因mRNA和蛋白水平,然后以四唑蓝(MTT)比色法检测细胞黏附性,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力。结果 7株乳腺癌细胞中,TROP-2均有不同程度的表达,以MCF-7细胞最高;以TROP-2 siRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后,癌细胞TROP-2基因mRNA和蛋白水平明显下降,且呈浓度依赖性;黏附试验结果显示,5、10、20 nM siRNA组黏附率分别为(52.9±2.5)%、(25.6±2.3)%、(12.8±2.2)%(P<0.01);Transwell试验结果显示,5、10和20 nM siRNA组穿过滤膜的细胞分别为(78±17)、(39±15)、(19±16),而对照组分别为(136±25)、(139±21)(P<0.01)。结论 TROP-2基因在乳腺癌细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染乳腺癌细胞,可抑制乳腺癌细胞黏附和侵袭能力。
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