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目的 建立人卵巢癌永生化细胞系 ,为卵巢癌体外研究提供实验模型。方法 利用基因重组技术构建猴肾病毒 4 0 (SV4 0 )T抗原基因的高效真核表达载体 pcD2 SV4 0。将其转染 10例原代培养的早期传代细胞 ,经G4 18筛选 ,抗性克隆扩大培养 ,建立永生化细胞系。免疫组化检测细胞的上皮起源 ,用PCR、RT PCR和SouthernBlot方法鉴定SV4 0T基因在转染细胞中的表达。观察所建立的永生化细胞系的染色体核型。结果 10例转染细胞中 ,6例筛选出抗性克隆。角蛋白免疫组化证实 3例为上皮起源。其中 2例上皮起源细胞得以扩大培养成系 ,长期稳定传代 ,分别命名为BUPH :OVSC 2和BUPH :OVCA 3。经鉴定两种细胞系中存在SV4 0T在基因水平及转录水平的表达。其染色体核型均符合人体恶性细胞特征。结论 利用SV4 0T抗原基因进行人卵巢癌原代细胞的永生化是一种可行的、可重复的建系方法 ,可提高卵巢癌细胞成系机率。