【摘 要】
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目的观察白细胞介素-17A(IL-17A)与γ干扰素(IFN-γ)对Graves眼病(GO)患者CD34-眼眶成纤维细胞(OFs)的作用，探讨GO的发病机制。方法收集5例GO患者眼眶减压术中获取的眼眶脂肪结缔组织以及泪腺组织，采用组织块消化法进行培养和传代。采用免疫磁珠富集其中的CD34- OFs。将培养的OFs分为转化生长因子-β(TGF-β)组、TGF-β＋10 ng/ml IL-17A组和T
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科 200011,上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科 200011,上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科 200011,上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科
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目的观察白细胞介素-17A(IL-17A)与γ干扰素(IFN-γ)对Graves眼病(GO)患者CD34-眼眶成纤维细胞(OFs)的作用，探讨GO的发病机制。
方法收集5例GO患者眼眶减压术中获取的眼眶脂肪结缔组织以及泪腺组织，采用组织块消化法进行培养和传代。采用免疫磁珠富集其中的CD34- OFs。将培养的OFs分为转化生长因子-β(TGF-β)组、TGF-β＋10 ng/ml IL-17A组和TGF-β＋100 ng/ml IL-17A组、TGF-β＋1 ng/ml IFN-γ组和TGF-β＋5 ng/ml IFN-γ组，在各组细胞培养液中均添加5 ng/ml TGF-β以诱导细胞发生纤维化，按照分组方法分别加入不同质量浓度的IL-17A或IFN-γ。采用Western blot法检测各组眼眶脂肪结缔组织和泪腺组织来源的CD34- OFs中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、ɑ-平滑肌肌动蛋白(ɑ-SMA)和组织金属基质蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)等纤维化相关蛋白表达。
结果在眼眶脂肪结缔组织来源的CD34- OFs中，TGF-β＋100 ng/ml IL-17A组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、α-SMA和TIMP-1蛋白相对表达量明显高于TGF-β组和TGF-β＋10 ng/ml IL-17A组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；TGF-β＋5 ng/ml IFN-γ组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原和α-SMA相对表达量均明显低于TGF-β组和TGF-β＋1 ng/ml IFN-γ组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。在泪腺组织来源的CD34- OFs中，TGF-β＋100 ng/ml IL-17A组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原、α-SMA和TIMP-1蛋白相对表达量明显高于TGF-β组和TGF-β＋10 ng/ml IL-17A组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；TGF-β＋1 ng/ml IFN-γ组细胞中纤连蛋白、Ⅰ型胶原和TIMP-1蛋白相对表达量明显高于TGF-β组和TGF-β＋5 ng/ml IFN-γ组，而α-SMA蛋白相对表达量明显高于TGF-β＋5 ng/ml IFN-γ组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论高质量浓度IL-17A处理可促进TGF-β诱导的CD34- OFs纤维化，而高质量浓度的IFN-γ则抑制TGF-β诱导的CD34- OFs纤维化。
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