【摘 要】
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目的 构建不同拷贝数的重复串联序列表达质粒,研究串联重复序列对表达质粒中GFP报告基因表达的影响作用.方法 将不同拷贝数的2F2R、AC和AT串联重复序列插入pEGFP-Alu14或pEGF
【机 构】
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河南大学医学院生物化学与分子生物学教研室,河南大学第一附属医院,开封市中医院
【基金项目】
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河北省自然科学基金(c2011206043).
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目的 构建不同拷贝数的重复串联序列表达质粒,研究串联重复序列对表达质粒中GFP报告基因表达的影响作用.方法 将不同拷贝数的2F2R、AC和AT串联重复序列插入pEGFP-Alu14或pEGFP-C1中,构建表达载体,瞬时转染HeLa细胞,提取RNA做Northern印记检测.结果 在4个拷贝数范围以内,2F2R随拷贝数增加活化基因作用增强,再增加拷贝数其活化基因作用反而下降;装有重复序列的质粒随转染剂量上升表达先上升后下降.结论 重复序列可能通过竞争反式调节因子来调节基因表达.
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