目的研究同型半胱氨酸(Hcy)对体外培养的大鼠心肌细胞的影响,并分析叶酸对DNA甲基化的作用以探讨叶酸对H9C2心肌细胞Hcy暴露的保护作用及其机制。方法用(0、 0.5、 1、 2)mmol/L Hcy处理H9C2细胞24 h,观察细胞形态,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况;设置2 mmol/L Hcy处理组、 0.1 mmol/L叶酸联合2 mmol/L Hcy处理组、 0.1 mmol/L叶酸处理组及DMSO对照组。处理24 h,采用以上方法检测细胞活力及细胞凋亡,MethylFlash总DNA甲基化ELISA试剂盒检测DNA甲基化水平,反转录PCR检测DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、 DNMT3a、 DNMT3b的mRNA水平,Western blot法检测DNMT1、 DNMT3a、 DNMT3b的蛋白水平。结果不同浓度Hcy处理24 h的H9C2细胞数随Hcy浓度增大而减少。与对照组相比,2 mmol/L Hcy处理组细胞活力降低、细胞凋亡增加,叶酸联合Hcy处理组细胞数、存活情况较Hcy处理组明显增加;与其余各组相比,Hcy处理组的细胞总凋亡率增加,甲基化水平明显降低,叶酸联合Hcy处理组DNA甲基化水平增加; DNMT1 mRNA水平仅在叶酸处理组明显升高,而DNMT1、 DNMT3a、 DNMT3b蛋白水平均未出现明显改变。结论叶酸能通过DNA甲基化减轻Hcy对大鼠心肌细胞的损伤。