YFP-CD18融合蛋白在U937细胞株中的表达与鉴定

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目的:构建并表达Mac-1的β链CD18与黄色荧光蛋白(YFP)的融合蛋白YFP-CD18,为进一步直视研究Mac-1在白细胞内的分布、走向及归宿提供物质条件.方法:首先将CD18的全长cDNA与pEYFP-C1进行酶切,构建YFP与CD18的N末端连接的表达载体,并将其转染至U937细胞株中进行表达.通过荧光显微镜观察转染成功后的U937细胞黄色荧光是否存在,以及流式细胞术检测确定PMA刺激后YFP-CD18活化后可否由胞浆内转位至膜上和测定PMA活化前后转染的U937细胞与其配基ICAM-1粘附活性的
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