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猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ohshady

【摘 要】

：

本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核

【作 者】

：

史平玲 邬成业 乔松林 张改平 王爱萍 肖治军 祁艳华 卜丹 

【机 构】

：

河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,郑州大学生物工程系

【出 处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2010年7期

【关键词】

：

猪FcγRⅠ受体 共转染 MARC-145细胞 poFcγRⅠ receptor  co-transfection  Marc-145 cell line 

【基金项目】

：

国家自然科学基金重点项目（30730068）, 国家973计划（2005CB522800）

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本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B（300μg·mL^-1和G418（400μg·mL^-1）共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪F

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