【摘 要】
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目的构建含受磷蛋白PLB基因的重组腺病毒载体,为研究受磷蛋白PLB的生物学功能提供工具。方法将RT—PCR获得的受磷蛋白PLBcDNA克隆至pShuttle—CMV载体,PmeI酶切线性化后,电转化
【机 构】
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温州医科大学检验学院、生命科学学院,第二军医大学基础部病理生理学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(面上项目)(31271221)
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目的构建含受磷蛋白PLB基因的重组腺病毒载体,为研究受磷蛋白PLB的生物学功能提供工具。方法将RT—PCR获得的受磷蛋白PLBcDNA克隆至pShuttle—CMV载体,PmeI酶切线性化后,电转化至含有腺病毒骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,从而获得重组腺病毒载体,PacI酶线性化该重组载体,转染293细胞进行病毒的包装和扩增,经超离心对重组病毒Ad—PLB进行纯化;测定病毒效价后,体外感染大鼠心肌细胞H9C2,Western blot法验证腺病毒病毒介导的重组PLB蛋白表达。结果成功构建了
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