微RNA-556-5p通过靶基因EDN3调控宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制

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目的

探讨微RNA(miR)-556-5p对宫颈癌癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。

方法

运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测宫颈癌HeLa细胞和正常宫颈细胞Ect1/E6E7中miR-556-5p和EDN3的表达水平;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-556-5p组(转染miR-556-5p mimics)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-EDN3组(转染pcDNA-EDN3)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-556-5p组(转染anti-miR-556-5p)、miR-NC+WT-EDN3组(共转染miR-NC和WT-EDN3)、miR-NC+MUT-EDN3组(共转染miR-NC和MUT-EDN3)、miR-556-5p+WT-EDN3组(共转染miR-556-5p和WT-EDN3)、miR-556-5p+MUT-EDN3组(共转染miR-556-5p和MUT-EDN3)、anti-miR-556-5p+si-NC组(共转染anti-miR-556-5p和si-NC)、anti-miR-556-5p+si-EDN3组(共转染anti-miR-556-5p和si-EDN3),均用脂质体法转染至HeLa细胞;采用CCK-8法检测各组细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;免疫印迹检测EDN3蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。

结果

宫颈癌HeLa细胞于正常宫颈细胞Ect1/E6E7,miR-556-5p的表达水平显著升高,EDN3 mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.05);miR-556-5p可靶向负调控EDN3的表达,miR-556-5p过表达,EDN3蛋白表达水平降低,抑制miR-556-5p表达,EDN3蛋白表达水平升高(P<0.05);抑制miR-556-5p表达、EDN3过表达均可抑制HeLa细胞、迁移和侵袭。抑制EDN3表达逆转了抑制miR-556-5p表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。

结论

miR-556-5p可抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向EDN3有关,将可为宫颈癌的预防和治疗提供新靶点。

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