稳定表达外源RbAp46基因的U937白血病细胞株的建立和初步特性分析

来源 :中国实验血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lichao984
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为建立RbAp46基因稳定转染的白血病细胞株,对悬浮培养的白血病细胞的电穿孔条件进行优化之后,运用电穿孔介导的转基因技术,在低电压、高电容的条件下将含RbAp46基因cDNA的表达质粒转染白血病细胞系U937,经G418筛选获得稳定转染的克隆,用PCR检测RbAp46基因的整合,用Western blot分析蛋白质的表达水平,然后筛选出表达外源RbAp46蛋白水平最高的亚克隆.用台盼蓝拒染法判定细胞活力,用细胞计数判定细胞生长速率.结果发现,转染RbAp46基因的U937细胞的生长速率比对照组低50%左右
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