利用骨骼肌细胞高效表达人基质金属蛋白酶-9

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ytx200909
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为探讨利用培养的骨骼肌细胞表达人基质金属蛋白酶的可行性,利用PCR和DNA重组技术构建人mmp-9-myc-his/pcDNA3基因表达载体,转染成肌细胞QM-7,G418筛选阳性转染子.诱导细胞分化成肌管后,收集细胞培养上清.经Western印迹检测,表达产物分子量为93 kD,与蛋白标准品对照推测表达量约10~15 mg/L.利用Ni-NTA琼脂糖从1 L培养上清中纯化到4~6 mg MMP-9纯品,纯化效率约50%.经明胶酶谱检测,表达蛋白可以降解明胶.这些结果表明:所表达的MMP-9具有生物活性,
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