pEGFP-C2-MeCP2重组质粒的构建和表达

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：suyu_001

【摘要】

：

目的构建人类甲基化CpG结合蛋白（MeCP2）基因的真核表达载体pEGFP-C2．MeCP2，在非洲绿猴肾成纤维细胞（COS-7）中检测其表达及定位。方法从人肝癌细胞（I-IepG2）中获得cDNA，以其为模板扩增M

【作者】

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彭云云黄成马陶陶徐涛李琳陈晨李俊

【机构】

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安徽医科大学药学院,安徽医科大学肝病研究所

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2014年9期

【关键词】

：

MECP2 COS-7 基因表达 MeCP2 COS-7 gene expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金（编号81273526、81202978）,新教师博士点基金（编号：20123420120001）

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目的构建人类甲基化CpG结合蛋白（MeCP2）基因的真核表达载体pEGFP-C2．MeCP2，在非洲绿猴肾成纤维细胞（COS-7）中检测其表达及定位。方法从人肝癌细胞（I-IepG2）中获得cDNA，以其为模板扩增MeCP2全长编码基因，克隆到载体pEGFP-C2上。构建的重组质粒测序后转染至COS-7细胞中，荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白的表达，检测MeCP2蛋白定位，Westernblot法和RT—PCR法鉴定MeCP2蛋白和基因表达。结果成功构建pEGFP-C2-MeCP2重组质粒，酶切鉴定片段为1

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