NT4-p53（N37）-HA2-TAT融合基因的克隆和鉴定

来源 :山西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yzl417801753

【摘要】

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目的构建NT4-p53（N37）-HA2-TAT融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互补引物二次PCR技术及T载体克隆法克隆p53（N37）基因，筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后用

【作者】

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白艳霞马清涌杨广笑王全颖

【机构】

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西安交通大学医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科,西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科,西安华广生物工程公司

【出处】

：

山西医科大学学报

【发表日期】

：

2009年12期

【关键词】

：

p53(N37) P73 基因克隆基因治疗肿瘤 p53 （ N37 ） p73 gene cloning gene therapy

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目的构建NT4-p53（N37）-HA2-TAT融合基因表达盒并进行序列分析。方法应用互补引物二次PCR技术及T载体克隆法克隆p53（N37）基因，筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序。扩增阳性重组质粒后用限制性内切酶切取p53（N37）和HA2-TAT片段连入pUC19／NT4质粒。结果克隆了p53（N37）基因，经酶切及测序证实结果正确；重组质粒pUC19／NT4-p53（N37）。HA2-TAT经限制性内切酶及琼脂糖凝胶电泳鉴定，结果显示酶切片段大小和理论值完全一致。结论通过基因克隆体外重组技术成功制备了含

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