论文部分内容阅读
目的 研究肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)水肿的中药良方黄芪汤对肾脏集合管上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)的调控效应和作用机制.方法 对小鼠肾脏集合管M-1细胞进行黄芪汤药物干预,并利用短发夹RNA敲减其腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的表达.通过Western印迹法、免疫共沉淀等方法研究黄芪汤对ENaC表达量的调控效应和AMPK/Nedd4-2/泛素化通路在其中的作用机制.结果 黄芪汤可显著提升M-1细胞AMPK和Nedd4-2的磷酸化激活水平,增强ENaC与Nedd4-2的结合作用和ENaC的泛素化水平,并下调ENaC膜表达的绝对量和相对比例;AMPK敲减后,黄芪汤对Nedd4-2和ENaC的上述作用显著减弱.结论 黄芪汤可激活肾脏集合管上皮细胞的AMPK/Nedd4-2/泛素化通路,下调ENaC膜表达水平,从而抑制其活性.该方改善NS水肿的药理机制可能与此有关.