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目的
建立一种肝脏原位混合型肝细胞-胆管细胞癌小鼠模型。
方法提取E13.5d小鼠胚胎肝细胞，使用标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)分离出肝祖细胞，使用反转录病毒使之组成性表达c-Myc(T58A突变)，进而采用脾注射的方法将1×106基因操作后的肝祖细胞通过门脉系统递送到受体鼠肝脏汇管区(实验组，6只)。脾注射相同数量的野生型小鼠肝祖细胞作为对照(对照组，6只)。脾注射8周后处死所有12只小鼠，病理学检查肿瘤发生情况，厚4 μm组织切片行免疫组织化学、免疫荧光检查鉴定肿瘤表型。
结果实验组成瘤率66.7%(4/6)，对照组成瘤率0%(0/6)；组织学表现符合人类混合型肝细胞-胆管细胞癌特征。免疫组织化学及免疫荧光检查提示肿瘤组织肝细胞标志物白蛋白(ALB)和胆管细胞标志物细胞角蛋白19(K19)的共定位表达。
结论脾注射组成性表达c-Myc(T58A突变)肝祖细胞成功诱导肝脏原位混合型肝细胞-胆管细胞癌小鼠模型。