【摘 要】
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目的探讨miRNA-181a对乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及其介导的乳腺癌细胞耐药性的调控作用。方法应用生物信息学预测BCRP mRNA-3’UTR与miR-181a的结合位点;荧光素酶报告分析检测miR
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No 30973559,81202551,81173092)
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目的探讨miRNA-181a对乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及其介导的乳腺癌细胞耐药性的调控作用。方法应用生物信息学预测BCRP mRNA-3’UTR与miR-181a的结合位点;荧光素酶报告分析检测miR-181a与BCRP mRNA-3’UTR的结合作用;qRT-PCR和Western blot检测细胞中相关蛋白表达水平。结果与阴性转染组比较,miR-181a mimic与PGL3-BCRP 3’UTR共转染后,荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。miR-181a mimic转染到MCF7/MX细胞48 h后,与阴性转染组相比,导致原本miR-181a低表达的MCF-7/MX细胞中miR-181a的表达增加(P<0.05),BCRP mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05),而MRP、P-gp、LRP的mRNA和蛋白水平均无明显改变(P>0.05);MCF-7细胞在miR-181a inhibitor转染48 h后,与阴性转染组相比,miR-181a的表达降低(P<0.05)。同时,BCRP mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。而MRP、P-gp、LRP的mRNA和蛋白水平无明显改变(P>0.05)。结论 miR-181a可通过靶向作用于BCRP mRNA-3’UTR区,调控BCRP表达。
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