评价β-抑制蛋白-1在盐酸戊乙奎醚抑制LPS致人肺微血管内皮细胞通透性升高中的作用。
方法人肺微血管内皮细胞以1×105个/ml的密度接种于6孔板(2 ml/孔)或培养瓶(4 ml/瓶)中，采用随机数字表法分为5组(n＝15)：空质粒转染组(C组)、LPS＋空质粒转染组(LPS组)、盐酸戊乙奎醚＋LPS＋空质粒转染组(P＋LPS组)、LPS＋β-抑制蛋白-1 shRNA转染组(LPS＋shRNA组)和盐酸戊乙奎醚＋LPS＋β-抑制蛋白-1 shRNA转染组(P＋LPS＋shRNA组)。LPS组和LPS＋shRNA组分别以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞，孵育24 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1 h；P＋LPS组和P＋LPS＋shRNA组分别以空质粒1.5 μg或含15 nmol/L β-抑制蛋白-1 shRNA的质粒转染细胞，孵育24 h时加入终浓度为2 μg/ml的盐酸戊乙奎醚，孵育1 h时加入终浓度为0.1 μg/ml的LPS孵育1 h。采用Transwell法测定细胞通透性，采用免疫荧光化学法检测热休克蛋白27(HSP27)的表达水平，采用Western blot法检测β-抑制蛋白-1、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达水平，并计算p-p38MAPK/p38MAPK比值。
结果与C组比较，LPS组、LPS＋shRNA组和P＋LPS＋shRNA组细胞通透性升高，HSP27表达上调，p-p38MAPK/p38MAPK比值升高，β-抑制蛋白-1表达下调(P<0.05)，P＋LPS组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与LPS组比较，P＋LPS组细胞通透性降低，HSP27表达下调，p-p38MAPK/p38MAPK比值降低，β-抑制蛋白-1表达上调，P＋LPS＋shRNA组p-p38MAPK/p38MAPK比值升高(P<0.05)，其余指标差异无统计学意义(P>0.05)；与P＋LPS组比较，P＋LPS＋shRNA组细胞通透性升高，HSP27表达上调，p-p38MAPK/p38MAPK比值升高，β-抑制蛋白-1表达下调(P<0.05)。
结论盐酸戊乙奎醚抑制LPS导致的人肺微血管内皮细胞通透性升高的机制完全与β-抑制蛋白-1有关。