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目的
论证上皮细胞间质样转化(EMT)能否诱导人甲状腺肿瘤干细胞(CSC)的发生。
方法转染缺氧诱导因子(HIF)-1α cDNA诱导甲状腺癌细胞发生EMT,并以Western印迹法、免疫荧光、Transwell及四甲基偶氮唑蓝(MTT)等技术验证EMT分子特征及行为特征的变化,应用荧光激活的流式细胞分选(FACS)技术对比EMT属性变化对细胞株中干细胞分选效率的影响,并鉴定所分选细胞的“干性”分子特征及自我更新和克隆形成能力。
结果转染HIF-1α成功诱导人甲状腺癌FTC133细胞完成EMT:E-钙黏蛋白上调,波形蛋白下调,β-连环蛋白核易位,细胞体现出显著增强的体外侵袭和增殖能力。另外,EMT后的FTC133细胞中CSC的分选效率明显升高(0.70%比0.03%,P<0.05)。所分选细胞具有“干性”分子标志,并体现出了典型的自我更新及体外致瘤能力。结论HIF-1α能够诱导人甲状腺癌细胞完成EMT,进而促使CSC发生。