【摘 要】
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目的:构建人表皮生长因子基因真核表达载体,并将其导入细胞中表达表皮生长因子重组蛋白。方法:经HindⅢ、BarnHI酶切PGEM-TEasy-hEGF,将人表皮生长因子基因定向克隆到真核表达载
【基金项目】
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河南省科研事业发展计划资助项目(0141163216)~~
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目的:构建人表皮生长因子基因真核表达载体,并将其导入细胞中表达表皮生长因子重组蛋白。方法:经HindⅢ、BarnHI酶切PGEM-TEasy-hEGF,将人表皮生长因子基因定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1中。在脂质体的包裹下将pcDNA3.I-hEGF导入角膜组织细胞中,分别从DNA、RNA、蛋白质3个水平上检测人表皮生长因子基因表达情况。结果:经T7/SP6和hEGF内套引物进行PCR扩增及酶切鉴定重组体,分别得到310bp和162bp两条基因片段,将162bp条带经纯化后用AVa皿限制性内切酶切
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