【摘 要】
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根据报道的cDNA序列,用RT-PCR的方法从美洲商陆夏季的叶片中克隆美洲商陆抗病毒蛋白-Ⅱ（pokeweed antiviral proteinⅡ,PAP-Ⅱ）基因.将PAP-Ⅱ基因克隆至表达载体pET-28a（＋）并在大
【机 构】
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浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室
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根据报道的cDNA序列,用RT-PCR的方法从美洲商陆夏季的叶片中克隆美洲商陆抗病毒蛋白-Ⅱ（pokeweed antiviral proteinⅡ,PAP-Ⅱ）基因.将PAP-Ⅱ基因克隆至表达载体pET-28a（＋）并在大肠杆菌中表达,SDS-PAGE电泳分析结果表明,PAP-Ⅱ蛋白在BL21（DE3）菌中获得表达,表达产物以不溶性包涵体形式存在,经过溶解包涵体、复性和BBST NTA树脂柱亲和层析纯化,获得高纯度的PAP-Ⅱ蛋白.用非放射性基于ELISA方法检测经过复性纯化后PAP-Ⅱ蛋白和蓖麻毒素A
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