辣木SCoT-PCR反应体系建立和引物筛选

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SCoT-PCR是一种单引物扩增分子标记方法,具有丰富的多态性,低廉的成本和较好的引物通用性,已在多种植物上加以应用。本研究采用L16(45)正交试验设计,对SCoT-PCR的影响因素进行优化试验,建立了适用于辣木的最佳SCoT-PCR反应体系,并对40条SCoT引物进行筛选。结果表明,25μL最佳反应总体积包含2.0 mmol/L Mg(2+),0.3 mmol/L d NTPs,1.5 U ExTaq,1.25μmol/L引物,50 ng DNA模板,其中,dNTPs对该体系的影响程度最大。此外,40
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