人C1酯酶抑制剂初步纯化过程pH值和聚乙二醇含量的优化

来源 :国际生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lionfirst
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨pH值、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)含量和离心条件对PEG4000粉末用于去除人C1酯酶抑制剂(C1 esterase inhibitor,C1-INH)制备原料中的IgM效果的影响,并通过对羧甲基(carboxymethyl,CM)离子交换层析中洗脱盐离子浓度的筛选,分离活性与非活性C1-INH。方法:向不同pH值的C1-INH制备原料中加入不同质量分数的PEG4000,于不同条件下离心后,用特定蛋白检测仪对离心后上清液中IgM和C1-INH含量进行检测,确定PEG沉淀法纯化C1-INH的最佳条件。将离心后上清液调节pH后作为CM离子交换层析上样样品,使用不同盐离子浓度的洗脱液对活性C1-INH进行分离,确定最佳的盐离子浓度。结果:在弱酸性pH(6.8)下,当PEG4000质量分数为12%,离心条件15 000×n g、25 ℃、20 min时,IgM去除率>99%,且C1-INH的回收率>80%;在盐离子浓度为200 mmol/L时,产物中C1-INH的比活性最大(4.43 IU/mg),且绝大多数杂质蛋白得以去除。n 结论:优化条件下,PEG4000能有效去除C1-INH制备原料中的IgM,且能保持较高的C1-INH回收率;CM离子交换层析能对活性与非活性C1-INH进行有效分离,并去除大多数杂质蛋白。
其他文献
目的:构建表达甲型H5N1禽流感病毒(H5N1 avian influenza A virus,H5N1 AIAV)NIBRG14株结构蛋白的重组痘苗病毒,为研制新型人用流感疫苗奠定基础。方法:通过反转录PCR扩增H5N1
目的:用响应面法对马来酰亚胺活化相对分子质量40 000的聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)(MAL-PEGn 40K)修饰胰高血糖素样肽1类似物(glucagon-like peptide 1 analog,GL
骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells, BMSCs)是一种非常有临床应用价值的多能干细胞,起源于胚胎中胚层,几乎可以在每个生物个体的骨髓中获取,并且在体外试验中已经被证实,
目的:对国产水痘减毒活疫苗进行质量分析,判断疫苗的安全性和有效性。方法:取2019年生产的102批水痘减毒活疫苗,进行鉴别试验、外观、pH值、渗透压摩尔浓度、水分、病毒滴定、
目的:通过研究3个批次无菌异丙醇在3种不同洁净度的环境中开瓶后,瓶内外观、无菌状态及异丙醇含量是否受到环境影响,初步确定无菌异丙醇开瓶后有效期。方法:从3个批次无菌异丙
结核病属中医“肺痨”范畴,多为痨虫感染,肺肾阴亏,虚火内扰所为,当以养阴润肺,清热泻火为治,在常规抗痨治疗时,可配合膏疗.历代本草治病方中载有许多蜜膏方,介绍几则,供选用
期刊
传统小学语文阅读教学方式过于单一枯燥,学生在课堂上不能够激发阅读兴趣,因此也就不能够将精力集中于课文的阅读上,导致学生文章阅读不透彻,从而限制了学生阅读过程中思维能力的
近些年来,随着国家对于特殊教育的关注,以及人们经济能力的提升,越来越多的特殊儿童获得了走进学校,接受教育的机会。然而面对这样一群特殊的学生,传统的对于普通学生的教育教学方