【摘 要】
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目的 分离提取和电镜观察小鼠肝癌细胞H22分泌的exosomes,并检测其含有的蛋白成分,为exosomes作为肿瘤疫苗提供理论依据.方法 超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到exosom
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室
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目的 分离提取和电镜观察小鼠肝癌细胞H22分泌的exosomes,并检测其含有的蛋白成分,为exosomes作为肿瘤疫苗提供理论依据.方法 超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到exosomes,并经透射电镜观察鉴定,运用肽质量指纹谱质谱分析和Western blot检测exosomes 含有的蛋白成分.结果 从小鼠肝癌细胞H22中提取出exosomes,直径约为20～90 nm的膜性囊泡,呈圆形或椭圆形.该exosomes含有热休克蛋白(HSP)70、ICAM-1、延伸因子G2、动力蛋白轻链A、C-myc和Vav-2蛋白.结论 超速分级离心和蔗糖密度梯度离心提取纯化exosomes的方法具有可行性,小鼠肝癌细胞H22源exosomes表达有与抗原呈递相关蛋白(HSP70、ICAM-1),迁移相关蛋白(动力蛋白轻链A),粘附相关蛋白(ICAM-1),细胞骨架相关蛋白(延伸因子G2),肿瘤相关蛋白(C-myc蛋白、Vav-2蛋白),具有免疫原性.
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