【摘 要】
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对来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的木聚糖酶XynⅡ进行同源建模和序列比较,发现第11族木聚糖酶的催化结构域在β折叠股A3和B3之间存在一个保守的氨基酸位点,该位
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学医药学院
【基金项目】
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国家863资助项目(2006AA10Z305)
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对来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的木聚糖酶XynⅡ进行同源建模和序列比较,发现第11族木聚糖酶的催化结构域在β折叠股A3和B3之间存在一个保守的氨基酸位点,该位点与木聚糖酶的pH特性有关,据此设计了XynⅡ的D37N定点突变。酵母表达的XynⅡD37N经纯化后与原酶XynⅡ(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,XynⅡD37N的最适pH由4.2升高到5.3,pH稳定范围由3.0~7.5缩减为3.0~5.5,但最适温度和热稳定性基本保持不变。结果证实,木聚糖酶XynⅡ的第37位Asp与最适pH相关,为进一步的结构与功能研究提供了理论基础。
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