【摘 要】
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目的:探讨乙肝病毒X蛋白（HBx）对肝星状细胞（HSC）活化的影响及其可能的分子机制。方法:构建稳定转染HBx基因的L02肝细胞（L02-HBx）,Western Blot鉴定细胞株中HBx蛋白的稳定表达。以L0
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金项目(81700546);陕西省教育厅西安医学院专项科研计划项目(16JK1664);西安医学院2016年博士科研启动基金项目(2016DOC15);西安医学院2017年配套基金项目(2017PT13)
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目的:探讨乙肝病毒X蛋白（HBx）对肝星状细胞（HSC）活化的影响及其可能的分子机制。方法:构建稳定转染HBx基因的L02肝细胞（L02-HBx）,Western Blot鉴定细胞株中HBx蛋白的稳定表达。以L02-HBx、转染空质粒（L02-pcDNA3.1）和未转染肝细胞（L02）的条件培养基,分别孵育肝星状细胞株LX-2,即LX-2/L02-HBx、LX-2/L02-pcDNA3.1、LX-2/L02,Western Blot检测上述各组细胞α-SMA （肝星状细胞活化标志）和NOX4的蛋白表达。以L02-HBx的条件培养基孵育LX-2细胞,分为转染si-NOX4（LX-2/L02-HBx+si-NOX4）、无关干扰片段（LX-2/L02-HBx+snc-RNA）、未转染（LX-2/L02-HBx）3组,Western Blot检测各组LX-2细胞的α-SMA蛋白表达。结果:L02-HBx中稳定表达HBx蛋白;LX-2/L02-HBx细胞中α-SMA和NOX4的蛋白表达显著高于LX-2/L02-pcDNA3.1、LX-2/L02细胞（P<0.01）;LX-2/L02-HBx细胞敲减NOX4后（LX-2/L02-HBx+si-NOX4）,α-SMA的蛋白表达显著低于LX-2/L02-HBx+snc-RNA和LX-2/L02-HBx细胞（P<0.05）。结论:肝细胞中表达的HBx蛋白可以通过HSC中NOX4上调α-SMA的表达,促进HSC的活化。
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